【鱼类精液冷冻保存】
即是应用低温生物学原理和技术，在－196℃(液氮温度)或－80℃(干冰温度)下保存鱼类精子的生命结构。冷冻精液可使不同生殖期或地理间隔的品系鱼得以交配，克服杂交育种不能自然交配的困难；可使性转换的个体得以自交；可部分解决鱼类人工繁殖中雌雄亲鱼成熟不同步的问题。利用冷冻保存技术建立名贵、优质和珍稀濒危鱼类的冷冻精子库，不仅可为鱼类遗传学和生物技术研究不间断地提供精子，还可将这些鱼类的雄性基因源长期保存下来。
1949年，波尔基(Polge)用低温成功地保存动物精子的研究开创了低温生物学学科。随后，低温生物学研究很快在医学、生物学、优生学、农学、畜牧学和水产学上开展起来。1953年，英国布莱克斯特(Blaxter)用干冰成功地保存大西洋鲱精巢长达6个月。早期研究主要在海水鱼类上进行。1968年，莫尼泊(Mounib)用冷冻30天的鳕精授精获得80%～89%的受精率；1972年，普林(Pullin)用液氮保存315天的鲽精授精，获得20%～39%的受精率。从70年代中后期开始，精液冷冻保存的重点已从海水鱼类转移到鲑、鳟鱼类。1975年欧特(Ott)等研究了银大马哈鱼、大鳞大马哈鱼和虹鳟精液的冷冻保存，获得冻精授精胚胎发眼率为29%～83%的结果。1978年，埃德尔(Erdahl)用冷冻鲑鱼精液授精获得约90%的发眼率。在70年代末和80年代初，德国斯托斯(Stoss)等对虹鳟精液的冷冻、解冻技术进行了系统深入的研究，用冷冻精液授精获得了85%的受精发眼率。进入80年代后，精液冷冻的研究已扩展到其他许多鱼类。1982年，哈维(Harvey)等冷冻斑马鱼精液，获57%的受精率。1982年，哈拉(Hara)等冷冻遮目鱼精液，获67．9%的受精率。黑仓寿等(1984)用在液氮中冻存342d的鲤精授精，获31．5%的受精率。中国学者卢敏得等(1981)冷冻草鱼、鲢和鳙精液，分别获得23．9%、50%和80．5%的平均受精率。王祖昆等(1984)用液氮保存60～90d的草鱼、鲢、鳙和鲮冻精授精，分别获得44．2%、32．6%、16．5%和31%的受精率。近年来，鱼类精液冷冻保存的研究又有新的进展，精液稀释、冷冻降温及解冻授精方法日趋完善。在冷冻容器上，塑料管法(0．5～1．5ml)的冷冻效果优于安瓿瓶和颗粒法，这一点已基本得到共识。冷冻稀释液的配制已有了一定的原则，即稀释液应能起到抑制精子运动，对精子无毒害，并且能给精子提供部分营养的作用，稀释液组成应尽可能简单。用于鱼类精液冻存的抗冻剂主要有甘油、甲醇和二甲亚砜。甘油已被证明为海鱼类精子的有效抗冻剂，其适宜浓度为11%～20%；而二甲亚砜则是目前发现的最有效的淡水鱼类精液的抗冻剂，其适宜浓度范围为8%～20%；精液与稀释液的适宜稀释比例已确定为1．1∶1．3。至于精子的适宜冷冻速率，多数学者认为鱼类精子可忍受－10℃／min～160℃／min的降温速率，但以－30℃／min左右为佳(黑仓寿等，1986；Gwo等，1991)。解冻后精子活力及受精能力是评价冻精质量的主要标准。迄今已报道的鱼类冻精活力的主要结果为：鲤鱼60%～65%(Cognie等，1989；陈松林等，1992)，罗非鱼70%(Chao等，1987)；金鲷60%～65%(chambeyron等，1990)；草鱼和鲢70%～75%；团头鲂65%(陈松林等，1992)。迄今为止，已对约40余种鱼类开展了精液冷冻保存的研究。现将近年来报道的主要结果列于下表。表1 近年来报道的鱼类精液冷冻保存的主要结果
(长江水产研究所陈松林撰)