【人用狂犬病疫苗】
拼译：rabies vaccine for human use
人狂犬病是一种世界性传染病，99%以上发生于发展中国家，特别是东南亚一些国家。对此病的防治策略，除加强有关动物管理与免疫以外，应用人用狂犬病疫苗对人进行免疫也是不可缺少的重要措施。 制备疫苗的首要条件为毒种。巴斯德于19世纪80年代初将狂犬疫苗通过兔脑连续传90代适应而成兔脑固定毒，并以兔中枢神经组织采用KOH干燥法制成疫苗，1884年在巴黎经动物实验证明有效，1885年7月6日第1次应用于人体，逐渐推广至世界各地。后经不断修饰发展的各种疫苗，按其病毒培养基质的不同，可分为3大类，即神经组织疫苗、鸡鸭胚疫苗与细胞疫苗。神经组织疫苗自1885～1955年由成动物脑疫苗发展至乳动物脑疫苗。鸡、鸭胚疫苗自1955年的粗制疫苗至1984年制成精制鸭胚疫苗。细胞疫苗自1960年后30年间由各种原代、传代系细胞疫苗发展成精制细胞疫苗(如表)。表1 人用狂犬疫苗 
人用狂犬疫苗的发展特点为经时长、品种多，80年代高效安全疫苗有巨大发展，但是尚有遗留问题待解决。细胞疫苗的应用应尽快代替脑组织疫苗。对应用疫苗后所出现的无效病例应充分研究，除疫苗外，必须考虑病毒变异与相关病毒的不同。刚开始生产疫苗的国家，人疫苗与动物疫苗在同一单位生产效果更好，应小心选择毒种，用此毒种生产的疫苗应对当地野毒株有保护作用。用于制备疫苗的毒种多来源于巴斯德株，即PV、PM、CVS，其次是SAD／ERA、FLURY-LEP、北京－aG株等。人用疫苗的新发展为：(1)脑组织疫苗。主要为减少致脑病因子由羊脑酚灭活疫苗改为乳羊脑B－丙内脂灭活疫苗，4d乳鼠脑疫苗改为1d乳鼠脑疫苗并经17000g／10min沉淀的上清疫苗。(2)鸭胚疫苗。以鸭胚培养病毒经过高度精制浓缩，使其与人二倍体疫苗同样有效。(3)细胞疫苗。为广用高效安全、针次少、使用方便的疫苗，按细胞类型可分为3种，即原代细胞为地鼠肾、狗肾、鸡胚纤维细胞和人、猴二倍体细胞系，传代细胞系如绿猴肾细胞为微载体大罐培养工业化生产疫苗。另外，传代细胞系如BHK可高产病毒，不需浓缩，原用于动物，如合乎WHO人用疫苗要求，可作为低价人用疫苗。为保持对热稳定，所有细胞疫苗应为冻干制品。加佐剂稳定的液体疫苗也可应用。细胞疫苗的效力要求为＞=2．5iU／1剂量。关于疫苗的使用，世界卫生组织提出，不论是发达国家与发展中国家应尽量或全部弃用脑组织疫苗，力求生产与使用细胞疫苗。对被疯动物或可疑疯动物咬伤者应及时作伤口处理，同时应用疫苗免疫或合用抗血清(马的或人的免疫球蛋白)。由于细胞疫苗的价格贵与数量少对未被咬伤者很难实现普遍的预防免疫，只能对有被感染危险者进行预防免疫，如病毒实验人员、传染病房医护人员、兽医、动物饲养人员、野生动物管理员、到流行区旅游人员，应用＞=2．5iU／1剂量细胞疫苗，于0、7、28d作肌肉注射(成人三角肌，幼儿大腿外侧，禁用臀部肌肉)或皮内注射，且定期加强免疫。对被咬伤者应用细胞疫苗，于0、3、7、14、30d5针次或2－1－1、3－1－1，即0、7、21d，0d2～3倍疫苗于二侧三角肌注射，或皮内0．1ml；0、3、7d前上臂两处注射，30、90d一处注射，对重复咬伤者应于0、3d肌肉注射或皮内注射，不用抗血清；对无中和抗体者作全程注射，甚至加用抗血清。对咬伤后处理指导分3类：(1)接触、饲养动物人员，完整皮肤被舔舐，不必作任何处理。(2)轻咬伤、抓伤不出血，及舐破皮者，应立即用疫苗免疫，观察犬、猫10d健康，即停止注射；死动物组织FA阴性亦可停止注射。(3)单处或多处破皮咬抓伤、粘膜污染唾液者，应立即用疫苗免疫，加用抗血清，观察犬、猫10d，健康即停止注射。死动物组织FA阴性亦可停止注射。伤口局部必须及时严格清洗消毒，应用抗血清必须作伤口周围与底部浸润注射。所谓第3代人用疫苗，为减针次能产生T、B两种细胞的长期免疫应答，对各种病毒株均有效且价格便宜的疫苗。分子生物学研究对狂犬病疫苗发展开辟了新的前景。某些对动物安全有效的重组狂犬病疫苗可能作为人用。这一代疫苗是应用克隆与基因表达的先进技术而获得的。基因表达载体有痘类病毒、腺病毒、杆状病毒等。痘类病毒如痘苗、浣熊痘可用于动物口服。痘苗曾用于全球消灭天花，但可出现合并症，如将外来基因插入痘苗TK基因部位可减少痘苗合并症，如VRG重组疫苗可激起至高的特异性抗体，可用牛羊制备低价疫苗，这样即可大量供应安全高效人用疫苗。删除痘苗18处毒性有关的核苷部位，即可成为安全的疫苗，或许对人安全的禽痘病毒，如金丝雀痘在人体所产生的中和抗体水平与细胞组织疫苗相同。再者，痘类病毒可作为麻疹、流行性腮腺炎、风疹、狂犬病、百日咳抗原的联合载体，更便于用于人的免疫。由于口服腺病毒疫苗如4、7型腺病毒疫苗已在军队使用多年，A5型重组腺病毒当可应用。在腺病毒基因E3区插入狂犬病毒G、N基因所获得的重组疫苗，实验室证明有高的保护抗体。杆状病毒可建造狂犬病毒G、N蛋白重组体，由其在细胞内表达的G．N蛋白，．可转至由细胞分泌，可试用于人免疫。BCG与沙门氏菌亦为有吸引力的传递抗原的微生物。实验证明用于咬伤后处理有保护效果的新制剂还有特异性单克隆抗体、内外源干扰素与白细胞介素－2。新的咬伤后处理程序，应进一步减针，为3－1程序即0、7d免疫，0天3倍疫苗量，双侧三角肌部位注射，可出现早而高的体液抗体(5d出现)与细胞介导抗体(6h出现)。总之，新的重组疫苗将是同时加强表达G．N抗原，增加体液与细胞介导免疫应答的活疫苗。此外，多肽疫苗也值得注意，应开发低价疫苗用于大量免疫。【参考文献】：1 Roumiantzeff N，Ajjan N，Branche R，et al．Rabies Vaccine Produced in Cell Culture：Production Control and Clinieal Results Applied Virology，1984，18：241～2962 Grey Freiher，Recombinant DNA Researh and Wildlife Studies Focus on Reducing the Spread of Rabies Research Resources Reporter，1986，5(4)：1～83 Sureau P．History of Rabies：Advances in Research Towards Rabies Prevention During the Last 30 Years Reviews of Infectious Diseases，1988 Vol 10 Supplement 4：S581～S5844 Dietzschold B，Bogel K，Glück R，et al．accine Provision and Development in Prgress in Rabies Control Edited by Thraenhart O，Koprowski H，BOgel K and Sureau P Wells Medical，1989，569～5715 Campbell J．B，Ying Zhang Rabies Virus Infection：new Vaccines and Strategies in Inmmunization for Publication in Control of Virus Disease，Editor：Kustk L，Marcel Dekker，New York MS Version：1992，20(8)：1～346 WHO Expert Committee on Rabies Eighth Report in WHO Technical Report Series 824 WHO Geneva 1992(世界卫生组织狂犬病专家顾问武汉生物制品研究所林放涛研究员撰) |