| 单词 | 鸡毒支原体 |
| 释义 | 【鸡毒支原体】 拼译：mycoplasma gallisepticum(MG) MG是一种重要的禽呼吸道病原，被认为是允慢性呼吸道病(CRD)的首要原因；由其他微生物引起的并发症，称之为有并发的慢性呼吸道病，是当前鸡场中最常见到的疾病。由此引起鸡的或火鸡的气囊炎或窦炎，在屠宰时会造成严重的损失，如胴体的降级、废弃，饲料－产蛋转换率下降，医药费用增加等，使CRD成为养鸡业面临的代价最为高昂的疾病之一。养鸡业在过去的20多年中，以广泛的控制措施，显著地降低了CRD的发生率，但在许多有多年龄层次商品产蛋鸡的大生产单位，MG感染的持续仍是一个主要问题。MG无公共卫生学意义。 MG是一种原核生物，在第九版伯吉氏(Bergey)《细菌手册》中，MG是软皮体纲支原体目支原体科支原体属内的一个致病种。支原体是能够在人工培养基上生长繁殖的体积最小、结构最简单的一类微生物。MG最初可能是由Nelson在20世纪30年代遇见的，他在1935年描述了一种与鸡的传染性窦炎有关的球杆状菌体，并使其能在鸡胚、组织培养和无细胞培养基上生长。是由Dodd在1905年精确描述的，并由Dickinson等在1938年定名为传染性窦炎。50年代早期，Markham和Van Rockel等相继报告了来自鸡的和火鸡的这种微生物被培养成功，并注意到它们的相似性，认为是类胸膜肺炎微生物(支原体属成员)。其他的早期报道描述了分离自鸡的和火鸡的这类微生物的某些培养和生化特性，其后的抗原性和血清这研究表明这些分离物抗原性均相似。1960年，Edward等明确了其分类学位置，命名为Mycoplasma gallisepticum。MG没有坚硬的细胞壁，整个细胞由3种细胞器组成，即DNA、核糖体和细胞质膜。它具多形性，一般是球状的，直径0．25～0．5μm，能通过0．45μm的微孔滤器。姬姆萨染色着色良好，呈淡紫色。在琼脂培养基上可以形成荷包蛋状菌落。经电子显微镜观察发现了一些形态学上的差异。应用超过薄切片技术加上负染色已使研究其超微结构和增殖模式成为可能。Shifrine等研究了生长着的菌落边缘并得出结论，即初级细胞是六边形的，来自于较大的细胞或是通过周边丝状体的断裂而成。Domermuth注意到MG胞体内及自胞体表现延伸的突起物中的蜂窝状致密体似乎在产生初级细胞，其中某些存在着核糖体。取决于不同的细胞及环境条件，可能有一种以上的细胞复制模式发生。MG需要一个相当复杂的培养基，有几种类型的液体或琼脂培养基可用于MG的选择性分离及生长。使用肉汤覆盖于琼脂斜面上对于初次分离显然是有其特别的价值。Frey等研制了一种含所有基本成分的培养基，包括酵母自溶物和葡萄糖，在加入10%～15%猪血清时，它对于MG的培养既方便又非常有效。抗原生产需要液体培养基，生产抗原的培养基和技术分别由Hall和Vardaman在60年代介绍过。MG也能在鸡胚中增殖。MG的生化性质和有关的生物学性质已有许多研究者报道：它发酵葡萄糖和麦芽糖而产酸不产气，不发酵乳糖、卫茅醇和杨苷；很少发酵蔗糖；对单乳糖、果糖、海藻糖及甘露醇的发酵结果不定。磷酸酶阴性。还原2、3、5－三苯四唑(变红)和新四唑(变蓝)。在琼脂培养基上引起马红细胞完全溶血，凝集火鸡和鸡的红细胞。MG对理化因子的抵抗力都很弱，在56℃条件下，30s内死亡半数。Yoder发现，感染的鸡胚孵化时在12～14h内经加热至46．1℃的内部温度，MG可被灭活。一般的化学消毒剂都能将其杀死。MG对冻融有一定的抵抗力。Yoder报道，MG肉汤培养物质被冻存于－60℃的情况下20多年后仍有活性。病鸡气管、气囊渗出物的悬液、鼻甲骨、肺或窦的渗出物，可直接培养于适当的肉汤或具覆盖层的琼脂培养基上。培养从鸡后鼻孔裂取样的拭子，已证明适用于分离MG。已从病鸡的精液、输卵管、泄殖腔中分离到MG。接种后的琼脂平板须置于一个非常潮湿的环境中经37℃培养3～5d。菌落生长与否最好借助于解剖显微镜以间接光线观察。特征性的菌落形态是：细小，圆润，光滑，半透胆，具有一个致密、突起的中心区，直径很少超过0．2～0．3cm。各种禽源支原体的菌落形态有不同，但不能藉此对菌株的种名作出定论。要证实分离物是否是MG，需经血清学方法检查。Talkington等报道，用免疫荧光方法鉴定琼脂平板表面的菌落是非常有效的。MG种内的各种菌株不应与支原体属内的禽源支原体的许多血清型相混淆。Zander的S6菌株是从一串窦炎火鸡的脑中分离的早期致病菌株；由Jungher等命名的A5969株，系VanRoekel提供的一株具病原性的培养物，该株已成为各种抗原生产的标准菌株；MG的F株目前在活疫苗免疫接种程序中普遍使用，是一株相对温和的菌株。然而最初的F株据Yamanmoto和Adler的描述是一株典型的致病菌株；R株是Dale Richey于1963年从一只患气囊炎的鸡中分离到的，Yoder将该致病性菌株用于灭活MG菌苗的研究；R株已被广泛地用于菌苗生产和作为致病菌株用于MG攻毒的研究。由Truscott、Mallinson、Yoder等分别获得的许多低毒力MG菌株，似乎代表着一种迟发的MG感染，这种感染一般没有症状，第26～38周龄时才第1次出现感染的血清学证据。这似乎与MG菌株的变异有关。MG的不同分离株在它们的相对致病性方面差异很大，视分离株的性质、增殖方式及传代代数而定。接种MG鸡胚的感染卵黄被认为比肉汤传代的MG更具感染力。火鸡比鸡敏感，MG接种后，火鸡常产生更严重的窦炎、气囊炎和腱鞘炎。1985年Levisohn等的研究资料表明，MG对鸡胚和鸡的致病性是有不同的。将MG的肉汤培养物或渗出物经卵黄囊接种于7日龄鸡胚常导致胚在5～7d内死亡，胚体的僵滞、广泛水肿、肝坏死、脾肿大是最典型的，但典型的死亡和病变的产生可能需要卵黄囊传代一次或多次。MG的自然感染发生于鸡和火鸡，但有从野鸡、鹧鸪、孔雀、北美鹑、日本鹑、鹦鹉、鸭、鸽、鹅、珍珠鸡分离到MG的报道。这些偶见的MG感染其作用尚不明确。MG对各种飞禽的致病性也没有定论。MG感染的传播主要是因易感鸡与带菌鸡的接触引起，也会因尘埃或飞沫而播散。该感染在鸡和火鸡中经常经蛋而垂直传染。许多研究者经过对易感鸡的实验感染已成功地产生了经蛋传递MG。MG感染常与环境以及致病微生物的并发感染有关。Gross和Fabricant等研究了MG、大肠杆菌、传染性支气管炎病毒(IBV)单独或多重感染对鸡的作用，当这3种因子联合作用时，他们复制出严重的气囊感染，并注意到除非MG单独或与IBV或与鸡新城疫病毒(NDV)先侵染气囊，否则，大肠杆菌不易感染气囊。许多研究者注意到，当MG和1BV都存在时，病的严重程度和持续时间都会增加。Trampel和Fletcher报道过用光学显微镜、扫描电镜观察MG感染鸡气囊的组织形态学结果。Tajima等研究过MG与鸡气管上皮组织间关系的超微结构详细情况。Abu及Takagi曾以感染的气管环移植方式进行相似的研究。Dykstra等应用扫描电镜显示了接种致病性MG后诱导的气管上皮和气管环培养的细胞病理学变化。Jordan等报道过北里霉素、硫粘菌素、泰乐菌素、Baytril对MG的最低抑制浓度。已见到MG对链霉、红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素产生抗药性的报道。70年代后期，灭活的MG菌苗和活的MG疫苗相继问世。10多年来，围绕这两类疫苗的效果评价和性能的提高，研究者们做了大量的工作。灭活菌苗比较安全，但保护力有限。鸡群接种后尚不能完全抵御强毒MG菌株的攻击；使用活MG疫苗(多数系F株制备的F系疫苗)具有较高的保护力，但免疫鸡群均呈MG阳性的血清学反应，故对建立无病群有影响。有研究者设想，用生物防治技术，即用MG的温敏变异株来取代活疫苗用于大型鸡场以最终消除MG的感染。近年来，核酸技术的应用已成为MG研究中一个重要的发展方向。1987年，Khan等合成了MG的种、株特异性重组DNA探针，并与野外样品进行斑点杂交，用于MG感染的快速诊断和制疫苗菌株的选择。Yogev等合成了核糖体RNA探针，用于测定MG与滑液支原体(MS)的种间遗传异质性。Kleven等用限制性核酸内切酶技术和DNA杂交技术，分析了F疫苗株与标准MG菌株间的异同。1990年，Kleven报告了以融限制性核酸内切酶消化、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳、DNA杂交、特异性探针检测为一体的指纹技术鉴别MG菌株的结果，显示了此技术在鉴别菌株、识别抗原方面具有更大的优越性。Krause等成功地用基因重组技术在大肠杆菌中表达了MG的表面多肽抗原，该抗原能被MG感染鸡的轿清抗体所识别。Nascimento等已将聚合酶链反应(PCR)技术用于MG的检测。Khan等用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法显示了MG的F株与标准MG菌株在蛋白质构型上的差异。Thomas等对MG菌株的细胞成分进行了检测。他们最近的报告指出，F株菌体内存在着1个75000道尔顿的免疫反应蛋白，认为这是F株的独特标志。Y．S．Hwang等报告了用单克隆抗体技术识别MG的特异性抗原。为达到最终控制继而清除MG的感染，下一步的目标将是产生一种改进的MG抗原制备方法，以对鸡群进行准确的筛选；在确定克隆的抗原可靠性基础上，将其用于MG感染的诊断；随着对致保持性抗体产生的抗原的定位、性质、构成等更进一步的了解，控讨将特定抗原克隆后制备工程疫苗的可能性；对MG的细胞成分及其作用、结构与致病功能的关系的进一步认识，也是十分有意义的；继续筛选和研制抗MG药物，解决MG菌株的抗药性是一个有待解决的问题。【参考文献】：1 Fery M L，et al．Am．J．Vet．Rse．，1968，29：2163～21712 Stone H D，et al．Avian Dis，1978，22：666～643 Kleven S H，et al．Avian Pathol．，1988，17：559～5704 Kleven S H，et al．Avian Dis．，1990，34：984～9905 Thomas C B，et al．Avian Dis．，1991，35：601～6056 Harry W，Yoder Jr．Diseases of Poultry，USA：Iowa State University Press，1991，9：196～212(上海市农业科学院畜牧兽医研究所闻人楚、郁明发副研究员撰) |
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