| 单词 | 猪白细胞介素2 |
| 释义 | 【猪白细胞介素2】 拼译：swine interleukin－2，il－2 1968年，杜蒙德(Dumonde)首先提出淋巴因子这一概念，用以概括活化的淋巴细胞所产生的除抗体以外的全部活性物质。此后，陆续发现和命名了多种淋巴因子。1976年，摩根(Morgan)等发现将丝裂原刺激的淋巴细胞培养上清加入骨髓细胞中，能选择性地使其中的T淋巴细胞增殖和长期持续培养，这种存在于淋巴细胞培养上清中能使T细胞在体外增殖的可溶性因子被称为T细胞生长因子(TCGF)。1979年，在瑞士召开的第2届国际淋巴因子会议上，为解决淋巴因子名称混乱的问题，将介导白细胞间相互作用的一些淋巴因子统一命名为白细胞介素(IL)，并按发现顺序以阿拉伯数字排列。将由激活的T细胞产生的TCGF命名为白细胞介素2(IL－2)。迄今已命名到IL－12，还会有更多的IL被发现。因为白细胞介素2是动物机体复杂免疫网络中起调节作用的最重要的淋巴因子，而且具有重大的实际应用价值，对IL－2的研究成了免疫学领域中的一大热点。目前，人们已从人、猴、牛、马、猪、兔、羊、狗、猫、大鼠、小鼠、豚鼠和鸡等的淋巴细胞中诱导出IL－2。 白细胞介素2是辅助性T细胞在丝裂原或抗原的刺激下产生的一种糖蛋白，不同种属来源的IL－2都具有相同的生物学活性，即能促进T细胞增殖分化，不仅能在体外长期维持T细胞(抗原特异性或非特异性细胞毒T细胞，抑制性T细胞，辅助性T细胞)生长并使之大量增殖，而且大剂量体内应用时也可使体内的淋巴细胞大量增殖，能够直接作用于B细胞刺激其增殖，促进B淋巴细胞的免疫应答，增强单核巨噬细胞的杀伤活性，促进NK细胞的增殖和增强其杀伤活性，并能诱导产生新型的杀伤细胞即淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)等。IL－2在机体的免疫反应中起着中心调节作用，表现为抗肿瘤、抗感染、矫正免疫缺陷、破坏自身免疫耐受性等作用。不同种属来源的IL－2作用范围存在一定的差异，不同种属间的IL－2的交叉反应性存在着下行性规律，即高等动物的IL－2可作用于低等动物的细胞；而低等动物的IL－2不能作用于高等动物的细胞；猪IIL－2除作用于猪的细胞外还可作用于羊和小鼠的细胞，但不能作用于人的细胞；而人IL2可作用于猪的细胞。猪L－2与其他来源的IL－2一样，具有明显的疏水性，此性质可用于IL－2的纯化。天然猪IL－2的制备可用丝裂原在体外刺激脾脏淋巴细胞或外周血淋巴细胞(PBL)诱导产生。将猪脾细胞培养在含10%新生牛血清的RPMI－1640培液中，猪脾细胞悬液浓度为5×106个细胞／ml，植物血凝素(PHA)的终浓度为350μg／ml，置5%CO2孵箱中37℃培养48h，离心后收获上清液，过滤除菌，可得猪IL－2的粗制品，除去丝裂原，继而进行纯化和活性测定。刀豆蛋白A(conA)也可作为刺激剂诱导产生猪IL－2。白细胞介素2的检测方法有生物学测定法和免疫学测定法两大类。IL－2生物学测定法常用的检测细胞有两类：一类是IL－2依赖性细胞株，其特点是只有在IL－2存在的培养条件下才能生长，否则会在短时间(24h)内死亡，CTLL细胞株对猪IL－2的反应性良好〔该细胞株是来源于小鼠IL－2依赖性的细胞毒T细胞株，由吉利斯(Gillis)等首先建立〕，可用于猪IL－2活性的测定。使用IL－2依赖性可能会发生变化的困难。另一类是新鲜制备的对IL－2有反应性的淋巴母细胞。这类细胞在IL－2存在的培养条件下生长能力增强，但无IL－2存在时并不死亡，可代替IL－2依赖性细胞用作IL－2的检测细胞，小鼠的胸腺细胞或脾细胞经丝裂原处理成激活的淋巴母细胞对猪IL－2有反应性，方法简单易行。生物学测定法的基本原理是通过比较待测样品与标准样品之间对检测细胞增殖能力的强弱来确定待测样品中的IL－2活性，常用的测定方法有〔3H〕TdR(氚化胸腺嘧淀核苷)掺入法和MTT〔3－(4，5－dimethylthiazol－2－yl)－2，5－diphenyltetrazolium bromide，四甲基偶氮唑盐〕比色分析法。〔3H〕TdR掺入法测定的是细胞合成DNA的水平，其敏感性高、重复性好，是目前IL－2活性测定的经典方法。MTT比色分析法反映细胞增殖时的能量代谢水平，根据细胞中微量酶与特定底物反应产生颜色，通过比色间接测定IL－2的活性。MTT法可以代替〔3H〕TdR掺入法测定IL－2的活性，简便、快速，特别适合于无法开展同位素工作的单位。免疫学测定法是和生物学测定法完全不同的一类IL－2活性检测法，是1984年以后发展起来的技术，用酶免疫测定法或放射免疫测定法测定IL－2的含量。与生物学测定法比较，有简单、快速、不必维持检测细胞、能排除影响生物学活性测定的多种因素的优点，但免疫学测定法所测到的是有免疫反应性的IL－2蛋白(有可能没有生物学活性)。目前免疫学测定法尚不够成熟。基因工程技术开拓了稳定生产大批量、高纯度、低成本IL－2的新途径。人重组IL－2(Taniquchi等，1983)、小鼠重组IL－2(Yokoto等，1985)、牛重组IL－2(Cerretti等，Reeves等，1986)相继向世。将人、牛的、鼠的3种天然IL－2的氨基酸序列相比较、可见它们之间存在着相当高的同源性，牛的与人的IL－2同源性为69%，鼠的与人的IL－2的同源性也高达50%，而且同源性的区段集中于多个与功能密切相关的活性部位，人、牛、鼠的IL－2均有作为信号肽。参与IL－2分泌过程的相似的前导肽，人、牛、鼠的成熟IL－2的氨基端有高度的一致性(均为APTSST)。于涟等从活化的猪脾淋巴细胞中获得含IL－2基因的cDNA，应用聚合酶链反应(PCR)技术，以寡聚核苷酸为引物扩增DNA，直接克隆于表达载体中获得高效表达，进行猪重组IL－2的研究。现已将人IL－2用于治疗肿瘤、某些感染性疾病和免疫缺陷病。1986年斯托特(Stott)等报道，人重组IL－2在体外能促进猪及牛外周血淋巴细胞的母细胞化。1989年，斯科尔(Scholl)等报道非洲猪瘟康复猪外周血单个核细胞诱导产生IL－2的活性高于未接触过非洲猪瘟病毒的正常猪。1991年，利尔杰(Lilja)等报道用ConA诱导猪外周血单个核细胞产生IL－2存在着遗传差异，来自公畜的这种遗传差异更为显著，建议把丝裂原诱导外周血单个核细胞产生IL－2的活性作为机体总体免疫反应性的指标。猪IL－2在中国的研究起步较晚，随着分子生物学技术及基因工程技术在兽医免疫学上的广泛应用，猪IL－2的受体研究和临床应用研究将会有较快发展。猪IL－2将是一种有广阔应用前景的兽医生物制品。【参考文献】：1 Morgan DA，et al．Science，1976，193：1007～10082 Gillis S，et J．Immunol，1978，120：2027～20333 Taniquchi T，et al．Nature，1983，302：305～3104 Yokota T，et al．Proc Natl Acad Sci．，USA，1985，82：68～725 Cerretti D P，et al．Proc Natl Acad Sci．USA，1986，83：3223～32326 Reeves R，et al．Proc Natl Acad Sci．USA，1986，83：3228～32277 Stott J T，et al．Vet lmmunol Immunopathol，1986；13～388 于涟，等．浙江农业大学学报，1989，15：169～1739 Lilja E，et al．Vet Immunol Immaunpathol，1991，27：351～36310 Yu Lian，et al．Agricultural Biotechnology，Beijing：China Science and Technology Press，1992．893～894(浙江农业大学于涟副教授撰) |
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