| 释义 |
【囊虫病血清学诊断】
拼译：serological diagnosis of human cysticercosis
囊虫病又称囊尾蚴病，是人体感染猪带绦虫之幼虫——囊尾蚴而引起。常见于亚洲、非洲和拉丁美洲的发展中国家。感染后囊尾蚴多寄生于皮下、肌肉、脑、眼等组织，造成相应的损害，特别是脑囊虫病可致严重的后果。由于本病的临床表现复杂，诊断比较困难，因而血清学试验具有重要意义，其不仅能辅助确诊，还可作为疗效考核的可靠依据，同时也是进行流行病学调查不可缺少的手段。 补体结合试验(CFT)是最早应用于囊虫病诊断的血清学方法，温伯格(G．Weinberg，1909)首先以CFT检测脑囊虫病患者脑脊液中的抗体。以后发展起间接红细胞凝集试验(IHA)，主要用于过筛病人。随着囊虫病作为严重的经济和公共卫生问题日益受到人们的重视，科学工作者对多种血清学方法进行了尝试。表1 囊虫病血清学试验方法的应用情况 
上述方法均曾试用于囊虫病的诊断、检测病人血清或脑脊液中的抗体，但它们的敏感性和特异性尚存在一些问题，常常有假阴性的或假阳性的出现，有时几种方法检测同一份标本结果不一致，其原因可能如下：(1)试验操作者的熟练程度不一；(2)方法本身的敏感性、特异性低；(3)抗原成分复杂，不同实验室应用诊断抗原浓度变化大；(4)囊尾蚴诱导或宿主的原因(如服用类皮质激素药物等)致使免疫应答多抑制，抗体水平低下；(5)宿主蛋白混入诊断抗原而产生假阳性结果；(6)囊尾蚴种间和种内可能存在不同的血清型。高新技术的发展和应用，解决了抗原分离、纯化、检测方法的准确性不高等问题，从而提高了血清学试验的敏感性、特异性和诊断效果。检测抗体：自1978年阿拉姆布洛(P．V．Arambulo)首先将酶联免疫吸附试验(ELISA)应用于囊虫病诊断以来，此方法已作为常规试验方法被广泛采用，且试验抗原不断更新，大大提高了其敏感性和特异性。贝利(G．G．Beily，1988)对猪囊尾蚴头节、囊液和囊壁抗原制剂进行比较，发现囊液抗原最敏感，应用该抗原进行ELISA，所有活动性脑囊虫病患者都得到阳性结果。南希门图(E．Nascimento，1987)等以囊尾蚴头节蛋白为诊断抗原检测22例确诊脑囊虫病人血清，阳性率为90．9%，同时检测绦虫病及其它寄生虫病患者血清，均未见交叉反应出现，认为头节蛋白抗原可提高特异性、减少交叉反应。由于猪囊尾蚴抗原成分复杂，人们试图用纯化的抗原来提高诊断效果。帕梅特(D．Pammenter 1987)等用等电位聚焦法对猪囊尾蚴成分进行分离，发现H+浓度10－10～1．59×10－8mol／L的带作抗原用于ELISA最敏感，检测活动性囊虫病的敏感性为80%，特异性为99．5%；南希门图(1987)等用单克隆抗体纯化的头节蛋白抗原做ELISA，具有100%的敏感性和特异性。另外，有人研制出简便、快速的ELISA薄膜斑点试验，又称Dot－ELISA，认为该法敏感、特异，且不需特殊仪器，适于现场应用。特桑(V．Tsang，1989)等报道，用植物凝集素亲和层析纯化的囊尾蚴糖蛋白作抗原，以酶联免疫印渍技术(EITB)对145例确诊囊虫病患者的血清和脑脊液进行检测，98%为阳性；而正常人及其它寄生虫病患者的血清共430份均呈阴性，表明此法的敏感性及特异性都甚满意。费尔得曼(M．Feldman，1990)等应用EITB检测囊虫病人血清和唾液中的抗体，并与ELISA进行比较，结果EITB检测血清的敏感性为100%，唾液为70．4%；而ELISA检测血清和唾液的敏感性分别为74．1%和82．1%。检测抗原：要确立诊断，在宿主体内检出抗原比检测到抗体更有说服力。检出抗原提示体内有囊尾蚴寄生，而非既往感染。另外，在化疗后，病人体内抗原短期内转阴，因而检测抗原还可作为疗效考核的依据。检测抗原的血清学试验发展较晚。埃斯特拉德(J．J．Estrada，1985)曾用免疫电泳法检测脑囊虫病患者脑脊液中的抗原，绝大多数未能检出。1989年他对脑脊液标本进行免疫电泳和免疫印渍分析，然后用兔抗囊尾蚴抗血清检测，18例神经囊虫病患者中，14例检测到分子量为19000和230000的抗原，而未检出抗原的4例病人，CT扫描显示两例为脊髓囊虫病，另外两例脑部囊尾蚴全部钙化。说明在所有的活动性脑囊虫病患者脑脊液中全都能检出抗原。特勒斯－基隆(E．Tellez-Giron，1987)报道，用兔抗囊尾蚴抗血清检测17例脑囊虫病人脑脊液中的抗原，用常规ELISA检出13例(77%)阳性，用斑点ELISA检出10例(59%)阳性，而这两种方法检测其它中枢神经系统疾病患者全部为阴性。陈捷平(1991)等用特异单克隆抗体抑制性ELISA法测定循环抗原，83例患者的血清抗原阳性率为71%；对41例脑囊虫病患者的血清和脑脊液检测，阳性率分别为78%和68．3%，单项或两项阳性的总阳性率为90．2%。而正常人和其他寄生虫病患者的血清和脑脊液全部阴性。此外，有23例患者治疗半年到1年后，21例抗原完全消失，提示检测抗原不仅可确定活动性感染，而且可考核疗效。乔罗曼斯基(L．Choromanski 1990)用高效液相色谱议(HPLC)对脑脊液进行分离，然后用兔抗血清对每个峰值标本检测，结果在79例疑似脑囊虫病患者中，44例检测到抗原，显示出良好的前景。血清学试验在囊虫病诊断中极为有用，但试验方法的敏感性和特异性有待提高。急需解决的问题有：分离并去除与其它寄生虫产生交叉反应的抗原成分；确定具有最大检出效能的最小抗原组分；辨别抗原变异或血清型。这些问题的解决将有利于抗原的纯化和检测方法的标准化，从而促进试验敏感性和特异性的提高。生物学技术的发展，为囊虫病血清学诊断开辟了新的途径。杂交瘤技术制备单克隆抗体，可望广泛用于循环抗原测定、考核疗效，并可用以纯化、制备高效的诊断抗原；重组DNA技术制备核酸探针，可望能用作高效、准确的囊虫病血清学诊断方法；重组DNA技术还可用以制备融合蛋白作为经济、理想、可靠的诊断抗原替代物。【参考文献】：1 Nascimemo E.et'al. J Clin Microbil, 1987,25(7): 1181 - 11852 BeilyGCetal. Trans RSocTrop Med, 1988,82(2) :295～ 2993 Estrada J J,et al. Am J Trop Med Hyg, 1989,41(1) :50～ 554 Tsang V,et al. J Inf Dis, 1989,159(1) :50～595 Choromanski L.et al. J Parasitol, 1990,76(1) :69～73(山东省寄生虫病防治研究所曹务春助理研究员撰，王家英审) |